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弗莱明于1928年发现青霉素抑菌作用，但其提纯与应用由后续科学家完成，原因涉及技术、环境与个人因素的综合作用。
关键限制因素对比表
| 因素分类 | 弗莱明时期局限性 | 后续团队突破点 |
|---|---|---|
| 提纯技术 | 缺乏有机化学分离手段 | 冷冻干燥技术应用 |
| 设备条件 | 实验室设备简陋 | 工业化生产设备支持 |
| 研究目标 | 专注抑菌现象观察 | 定向药物开发导向 |
| 团队协作 | 单人研究模式 | 多学科专家联合攻关 |
技术瓶颈制约
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物质稳定性问题
青霉素在常温下迅速失效，弗莱明采用的液体培养法无法保存活性成分，其团队仅能通过连续传代培养维持菌株特性。 -
分离技术缺失
当时层析法与离心技术尚未成熟，弗莱明尝试的过滤手段仅能获取粗提物，纯度不足0.1%，远低于临床所需的95%标准。
研究环境局限
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学术认知差异
20世纪30年代前，医学界普遍怀疑微生物产物的治疗价值。弗莱明1929年发表的论文仅被引用21次，直至1939年牛津团队重启研究前未获重视。 -
战争需求推动
二战伤员感染救治的迫切需求，促使英美政府投入150万美元（相当于现今2500万美元）支持量产研究，而弗莱明所处时代缺乏此类战略投入。
个人研究特征
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专业领域限制
作为细菌学家，弗莱明更关注青霉素的实验室抑菌效果，而非临床转化。其1929-1939年间发表的17篇论文中，仅3篇涉及青霉素研究。 -
合作模式差异
弗洛里与钱恩团队包含病理学家、化学家与工程师，形成跨学科协作网络，而弗莱明长期保持独立研究状态。